Regulaciones y recomendaciones para el envío internacional de semen canino enfriado y congelado

1. Introducción

El interés en el envío internacional de semen canino está aumentando a un ritmo acelerado, al paso que la cria de perros se esta convirtiendo en un pasatiempos cada vez más internacional, y reconociendo la necesidad de ampliar la reserva de genes para mantener las razas reconocidas sanas y a salvo. El semen canino puede ser enviado enfriado ó congelado. Determinar cuál de éstas opciones es la más conveniente dependerá de numerosos factores, tales como la distancia de envío y si el semen enviado está destinado para la inseminación artificial (IA) de una ó varias hembras, así como también de las leyes y regulaciones del país en cuestión. En varios países se aplican reglas diferentes a países distintos con respecto a la importación/exportación del semen canino. Las reglas para la importación del semen enfriado pueden ser diferentes de las que se apliquen al semen congelado. Las regulaciones del país importador anulan a veces la posibilidad de utilizar semen enfriado. Las Asociaciones Nacionales de Criadores pueden solicitar con anterioridad permiso para utilizar semen importado, ya que generalmente requieren la identificación apropiada del donante del semen por medio de microchip, tatuaje de identificación y/ó una prueba de ADN.

Se debe tener presente que las regulaciones de la legislación nacional y de la Asociación de Criadores pueden variar en cualquier momento. Por lo tanto, antes de emprender la exportación de semen canino, siempre se recomienda que el propietario de la hembra ó el importador del semen se ponga en contacto con el Ministerio de Agricultura (ó la autoridad correspondiente) y la Asociación de Criadores del país importador para recibir la información sobre el último conjunto de reglas y regulaciones. Estos contactos se deben hacer con bastante anticipación a la recolección y envío del semen planeados, para poder hacer todos los certificados médicos y análisis de sangre necesarios que establezcan los requisitos. Se puede encontrar una lista de direcciones en el Apéndice 1. (El Apéndice 1 fue compilado originalmente en el 2001, y aunque ha sido revisado considerablemente, las normas pueden haber cambiado en muchos países. Verifique siempre la útlima versión).

2. Requisitos del ministerio de agricultura

Cuando se trata de las legislaciones nacionales referentes a la importación del semen canino, los diferentes países quedan básicamente en una de las siguientes cuatro categorías:

Categoría 1
Ninguna restricción.

Categoría 2
Un certificado médico veterinario emitido en el momento de la recolección de semen, indicando el número de microchip o tatuaje de identificación del donante de semen. (Este requisito se aplica hoy en día para la mayoría de los países de la UE).

Categoría 3
Es necesario un permiso de importación.

Categoría 4
Se requiere un permiso de importación, un certificado veterinario de salud para el donante de semen, indicando el número de microchip o tatuaje de identificación, y emitido al momento de la recolección del semen, o en un intervalo de tiempo estipulado antes y/o después de la recolección del semen.

Categoría 5
U un permiso de importación, un certificado veterinario de salud para el donante de semen emitido al momento de la recolección de sement, o en un intervalo de tiempo estipulado antes y/o después de la recolección del semen, y una prueba serológica para leptospirosis (generalmente L. canícola y L. icterohemorrágica) y/o para Brucella canis. [Nótese que las muestras de sangre en algunos casos se deben tomar antes (generalmente en un plazo de 15 - 45 días antes), en otros casos al momento de la recolección el semen y a veces después (generalmente 20 - 30 días, 30-45 días ó 3 - 6 semanas después de la recolección de semen].

Algunos requisitos adicionales que pueden ser aplicables (en el apéndice 1 estos están marcados con "+"):

• El donante de semen debe no haber estado fuera del país exportador durante un período de 2 a 12 meses antes de la recolección del semen
• Que el donante de semen haya sido muestreado para la leishmaniasis entre 30-45 días después de la recolección del semen (en la actualidad se requiere para importar semen a Australia)
• El donante no ha sido utilizado para servicio natural desde el análisis de sangre hasta la recolección del semen
• El donante de semen debe ó no debe, ser vacunado con diferentes vacunas (por ejemplo, rabia) en un tiempo variable antes de la recolección del semen
• La perra inseminada no debe ser servida con otro perro durante el mismo ciclo y en caso de que ocurriera un aborto, se debe notificar de inmediato al Ministerio y los fetos deben ser examinados
• El permiso de importación original debe acompañar al envío, o ser presentado en la aduana al llegar.
• El envase de nitrógeno líquido debe ser nuevo ó sin usar
• Los huevos utilizados para los diluyentes del semen deben ser de un criadero de gallinas libres de la enfermedad de Newcastle

3. Requisitos de la Asociación de Criadores

• Algunas Asociaciones Cinofílicas no tienen ninguna regulación lo cual significa que el uso de semen importado de perro está permitido, pero tambien puede querer decir que el registro de camadas por semen importado no está oficialmente autorizado. Esto debe corroborarse bien por adelantado. Sin embargo, la carencia de regulaciones significa generalmente que no hay restricciones, ó bien que no hay controles sobre si la hembra ha sido servida naturalmente, ó si se ha importado el semen y la hembra se ha inseminado artificialmente.
• La mayoría de las Asociaciones de Criadores solicitan que el donante del semen sea registrado por una Asociación de Criadores reconocida oficialmente.
• Las Asociaciones de Criadores también solicitan generalmente que se identifique permanentemente al donante del semen mediante un tatuaje ó un microchip, y que el veterinario que realiza la recolección del semen atestigüe fehacientemente que se ha controlado la identidad de perro.
• La mayoría de las Asociaciones de Criadores solicitan que el donante del semen tenga un estado testicular normal.
• Algunas Asociaciones de Criadores solicitan con anticipación que se pida permiso para utilizar semen importado.
• La Asociación Americana de Criadores (AKC) solicita que se envíe una muestra de ADN. Se toma con un hisopo especial para mejillas proporcionado por dicha Asociación (véase el Apéndice 1).Algunas Asociaciones de Criadores tienen un programa de erradicación de varias enfermedades hereditarias en algunas razas (por ejemplo displasia de la cadera, atrofia retiniana progresiva y nefropatía progresiva, y solicitan que el donante del semen esté muestreado y libre de cualquiera de las enfermedades mencionadas.
• Otros requisitos pueden ser que los perros muestren que pueden aparearse normalmente ó que hayan probado ser fértiles.

4. Recomendaciones generales de la documentación mínima que debe acompañar los envíos internacionales de semen canino

Para cumplir con la mayoría de las varias ordenanzas y regulaciones nacionales, y como cortesía para el colega que realizará la I. A., se recomienda que cada envío internacional de semen canino vaya acompañado por la siguiente documentación, y que los procedimientos siguientes sean realizados incluso cuando esto no sea requerido formalmente:

• Un certificado veterinario de salud, indicando el número de microchip o tatuaje de identificación del perro donate y una declaración de que el perro tiene un estado testicular normal (un ejemplo de tal certificado se proporciona en el Apéndice 2).
• Un certificado de la valoración de la calidad del semen, y en el caso de semen congelado, también las instrucciones para la descongelación, junto con una recomendación de cuántas pajillas, ó de viales en el caso de pastillas de semen, se deben utilizar para cada IA (un ejemplo de tal certificación se da en el Apéndice 3).
• Debe siempre utilisarse el nombre correcto de registro del animal para todos los documentos oficiales, incluyendo el informe del análisis de sangre, y no el nombre familiar.
• Incluir siempre un conjunto de copias de todos los certificados, adjuntados en la parte externa del paquete de envío, ó en la interna, como precaución en el caso de envío aéreo en que los certificados originales puedan perderse en el trayecto, ó sean quitados por error, por ejemplo por la aduana de un país de tránsito.
• Las pajillas ó viales con pastillas deben empaquetarse de tal modo que sean fáciles de pasar desde el termo de transporte al termo de almacenamiento, es decir, deben estar en cartuchos y bastones, ó en cubiertas plásticas, las que estarán correctamente rotuladas (para la rotulación, vease abajo).
• Si el semen se congela en pastillas, no olvidar incluir las bolsas plásticas utilizadas para descongelar (Whirl-pak, Nasco, USA), las cuales no están disponibles fácilmente en todos los países.
• Siempre que sea posible, aplicar un sello en los frascos térmicos, cajas de poliestireno ó unicel, ó termos de nitrógeno líquido (LN2) incluso cuando esto no sea requisito oficial. Esto evita que las personas no autorizadas puedan abrir el envío, reduciendo al mínimo los riesgos de daño. Es preferible poner el sello directamente en el frasco, caja ó termo, y no en su contenedor externo. Los termos de LN2 generalmente están equipados con un anillo separado para los sellos. Si se utiliza un sello numerado, el número debe figurar en el certificado veterinario.

5. Como identificar las pajillas ó viales de semen

Para cumplir los requisitos de la mayoría de los países, las pajillas, ó viales que contienen semen, se deben siempre ser marcados con la siguiente información:

• La raza (que puede abreviarse),
• El nombre de registro del perro en la Asociación de Criadores (que puede ser abreviado),
• El número de registro del perro, o el número de microchip (para Australia el número de microchip es requerido)
• La fecha de recolección del semen (obligatoria cuando se requieren permisos de importación, los análisis de sangre y los certificados veterinarios), y
• Donde fue recolectado/procesado el semen.

Ejemplo:

Las marcas de identificación de las pajillas ó de los viales deben también aparecer en los certificados.

6. Semen canino diluído enfriado

El semen canico se envíe habitualmente despues de diluido y enfriado a 5°C (41.0°F). El semen canino diluido y enfriado puede conservar la motilidad e integridad de su membrana por lo menos durante 1-2 semanas o más [12,14], aunque todavía queda por determinarse con más detalle por cuánto tiempo puede conservar también su capacidad de fertilización.

6.1. Diluyentes para semen canino enfriado

Se dispone comercialmente de un número de diluyentes para semen canino enfriado, la mayoría son patentados como por ejemplo el kit CLONE y el Synbiotics (Zoetis) Fresh Express, CaniPro de Minitübe 5 o 10 días, etc. Un diluyente no-patentado y cientificamente bien documentado para semen canino enfriado (Apéndice 4) esta ahora comercialemnte disponible (Appendix 4) is now also commercially available (www.canirep.com). Este viene en crioviales de 4 ml que se conservan congelados y estan listos para usarse despues de descongelarlos. Un vial es suficiente para el enfriado de 1-2 eyaculados. Los diluyentes para semen canino deben contener siempre algunos antibióticos para prevenir el crecimiento bacteriano y el riesgo de propagación de enfermedades. En invierno, o cuando se envie el semen enfriado en uno de los vuelos de duración prolongada, existe el riesgo de que la temperatura caiga por debajo del punto de congelación. Un diluyente conteniendo 3% de glicerol, como por ejemplo CaniRep Uppsala Equex II, diluyente 1 or el CLONE primer diluyente para congelación, protegerá a la muestra de semen de daños por congelación.

6.2. Preparación del semen congelado

Se recolecta la segunda fracción del eyaculado, rica en espermatozoides, y se determina el número total de espermatozoides, la morfología espermática y la motilidad. Después se centrifuga a 300 - 700 G durante 5 - 6 minutos. Se desecha el plasma seminal sobrenadante (que es perjudicial para los espermatozoides durante el almacenamiento), y se agregan 2 - 5 ml de diluyente (a la misma temperatura del semen) al pellet de esperma y se mezcla bien. El uso de volúmenes mayores para la IA solo conducirá a la pérdida de espermatozoides debido al reflujo del semen desde el útero ó la vagina. El semen entonces se enfría alrededor de +5°C durante 30 - 45 minutos, ó se pone en la caja de poliestireno ó unicel con bolsas de hielo para que se enfríe durante el transporte. Si se utiliza para el envío un frasco térmico, este también se debe enfriar antes de agregar la muestra de semen. Antes de poner la muestra en el frasco ó caja evalúe una gota de semen re-calentado para saber si conserva la vitalidad después de ser enfriado. Se ha utilizado con éxito semen original de buena calidad preservado de esta manera y almacenado enfriado durante más de una semana, pudiéndose utilizar probablemente durante un tiempo considerablemente más largo si este se mantiene en bajo condiciones de enfriamento ininterrumpido. Identifique el vial de semen con la raza del perro, su nombre de registro, el número de registro número de microchip, y la fecha y lugar de recolección (véase arriba). Siempre que sea posible en la práctica, debe aplicarse un sello numerado a los frascos térmicos ó a las cajas de tergopor. Esto es requerido por algunos países, y como se mencionó más arriba, evita que personas no autorizadas abran el paquete interno que contiene el semen. Si el sello tiene un número, este debe indicarse en el certificado veterinario.

6.3. Envío de semen canino enfriado

Utilizar tubos plásticos estériles para el semen, de preferencia crioviales pequeños de 5 mL o tubos Nunc de 12 mL con una tapa de rosca hermética que no se escurren o rompen durante el transporte. Si el semen será utilizado para más de una IA, la muestra debe dividirse en 2 tubos separados, de manera que la porción que se utilizará para la segunda inseminación pueda mantenerse en el refrigerador para evitar fluctuaciones de temperatura que son perjudiciales para la longevidad de los espermatozoides.

El semen enfriado se envía generalmente en una caja de poliestireno con bolsas de hielo (www.minitube.com) que enfría la muestra a una velocidad adecuada y luego mantiene la temperatura baja durante 48 horas. Si el envío tarda más de 48 horas, por ejemplo durante un fin de semana, se puede utilizar un Equitainer que tiene un tiempo de retención de 72 horas. Una caja de poliestireno o un frasco térmico ordinario también pueden ser usados, pero tienen un tiempo de retención más corto. Es imperativo que la temperatura no descienda por debajo de 0°C (32,0°F) para asegurarse de que el semen no se congele. Por lo tanto, cuando no utilice las cajas de poliestireno especiales, el tubo que contenga el semen debe protegerse del contacto directo con los cubos de hielo ó las bolsas de refrigerante, por ejemplo metiendolo en un tubo externo o envolviéndolo en algodón. El frasco térmico y las cajas de poliestireno pesan poco y no cuestan mucho dinero y generalmente no necesitan ser devueltos, lo cual mantiene bajos los costos de envío. El Equitainer, por otro lado, es bastante más caro y por lo tanto se devuelve al dueño.

Figura 1. La caja refrigerante de neopore de Minitübe para semen canino enfriado tiene tiene un tiempo de retención de 48 horas.

Figura 2. El Equitainer puede ser utilizado también para semen canino enfriado y tiene un tiempo de retención de 72 horas.  

Figura 3. El recipiente de uso único dry-shipper pesa entre 4.5 y 5.0 kg cuando está lleno y tiene un tiempo de retención de 4 días.

Figura 4. Los recipiente ordinarios dry-shipper pesan alrededor de 15 kg cuando están llenos y tienen un tiempo de retención de 2 a 3 semanas. Una envoltura exterior protectora en forma de hongo es preferible a una caja cuadrada ya que el primero no será colocado sobre su costado, y no se puede colocar nada por encima de esta durante el envío.

Resultados usando semen canino diluido enfriado

Las tasas de parición de 5774 inseminaciones artificiales usando semen enfriado diluido informadas fueron del 45.1% cuando el semen fue depositado en la parte craneal de la vagina, y del 65.6% cuando el depósito del semen fue intrauterino transcervical. El tamaño promedio de la camada fue de 5.8±3.0 cachorros por IA vaginal, y de 6.4±3.2 por IA intrauterina (P<0.001) [3, Linde Forsberg and Andersson, en preparación)]. Los resultados de estos estudios ponen énfasis en la importancia del depósito intrauterino del semen no solamente para el semen congelado-descongelado [8], sino también cuando se utiliza semen canino diluido enfriado y semen canino fresco.

7. Semen canino congelado

El semen canino congelado se puede almacenar casi indefinidamente probablemente por 1-2000 años o más. El semen canino se puede congelar en pajillas francesas de 0.5 ó 0.25 ml ó en pastillas. La mayoría de las agencias europeas que congelan semen y los veterinarios que realizan las IA prefieren las pajillas de 0.5 ml. Una ventaja más es que su identidad no puede ser manipulada después de la congelación, mientras que los viales con pastillas pueden ser cambiados fácilmente.

7.1. Diluyentes para congelar semen canino

Hay numerosos lugares ó agencias que congelan semen de perro, utilizando diluyentes patentados, tales como Camelot Farms, Canine Cryobank, IMV Canifreeze, Minitübe CaniPro, CLONE, International Canine Semen Bank y Zoetis. Otros usan los sistemas no-patentados, como el diluyente CaniRep Uppsala-Equex II (Apéndice 5) [5].

7.2. Preparación del semen congelado

Se recolecta y centrifuga el semen según lo descrito anteriormente para la preparación enfriada del mismo. Puede ser procesado de muy diversas maneras, utilizando varios diluyentes y una ó dos etapas de dilución (la primera a temperatura ambiente y la segunda después de enfriarlo y justo antes de la congelación), equilibrándolo durante 1 a 4 horas y congelando, por ejemplo en vapor de nitrógeno líquido en un bastidor 4 centímetros sobre la superficie del N2L en una caja de poliestireno [1,10,11] ó en tres pasos directamente en un tanque de nitrógeno líquido [8,10,11]. La mayoría de las agencias congelan semen canino con una concentración final de 50 - 100 millones de espermatozoides por cada pajilla de 0.5 ml, y utilizan 2 - 4 pajillas por IA. Con el sistema de pastilla, generalmente se pone una unidad en cada criovial de pastillas. Algunos usan un medio de descongelación, generalmente 0.5 - 1 ml para cada pajilla, ó 1 - 2 ml por cada vial de pastillas. El semen se descongela en baño María a 37°C durante 15 - 60 seg ó a 70°C durante 8 seg. Es importante seguir al pie de la letra las instrucciones de descongelación proporcionadas por la agencia que congeló el semen, pues el método de descongelación es dependiente de la técnica de congelación.

7.3. Envío de semen canino congelado

Para enviar semen congelado se requiere un tanque de nitrógeno líquido que mantenga la temperatura aproximadamente a -197°C. La mayoría de los lugares que hoy congelan semen utilizan los llamados tanques secos, que absorben el nitrógeno líquido en un material poroso localizado en sus paredes internas. Estos tanques no derraman el nitrógeno y por lo tanto no necesitan ser enviados como mercancías peligrosas, lo que resulta más restringido y caro. Sin embargo, son frágiles y se pueden romper facilmente por una mala manipulación. Generalmente se envía el tanque en una caja plástica para protegerlo. Las cajas plásticas vienen en forma cuadrada y en forma de hongo, la cual ofrece la mejor protección, porque esta forma previene que la caja sea transportada acostada ó bien que le coloquen algo por encima Algunos lugares de procesamiento de semen requieren que el termo sea asegurado por daños durante el envío. El código de envío de nitrógeno líquido para la declaración del remitente es: UN1977, que informa su estado de "mercancías restringidas". Las regulaciones que rigen específicamente a los tanques secos se encuentran en la Nota 202 de instrucción de embalaje de IATA, que dice: "No están sujetos a estas regulaciones los recipientes aislados que contienen nitrógeno líquido refrigerado absorbido completamente en un material poroso y destinados para el transporte, a baja temperatura, de productos no peligrosos... "

Cuando los tanques secos ordinarios están llenos y contenidos en su caja protectora externa, por lo general pesan entre 7 y 15 kg, y necesitan ser enviado de vuelta, los costos de flete serán bastante elevados. Por otro lado, varias dosis de semen o semen de varios perros pueden ser enviadas en un envío. El costo de flete para un DryShipper 3.0 de uso único (www.strepro.com, En Europa: www.huvesearch.com), con un tiempo de retención de 4 días y un peso de sólo 4,5 - 5,0 kg es considerablemente menor, y ademas no hay que devolverlo lo cual reduce el costo de flete hasta en un 75% comparado con el costo de flete de los tanques secos ordinarios. El DryShipper 3.0 es compatible con la Provisión Especial IATA A152 y ha sido aceptado como equipaje de mano por varias compañías aéreas (Reglamentación IATA sobre Mercancías Peligrosas, inciso 2.3), ya que el diseño del DryShipper es tal que no permite la acumulación de la presión dentro del contenedor y no permitiría por nada la liberación de nitrógeno líquido refrigerado independientemente de la orientación del envase aislado.

7.4 Revisión del tanque de nitrógeno líquido

Antes del envío debe rutinariamente revisarse que el tanque de nitrógeno líquido no esté roto. Por lo tanto:

• Llenar siempre el tanque con nitrógeno líquido por lo menos 24 horas antes de realizar el envío. Los tanques secos tienen que ser llenados durante un período de tiempo, y dejando que se saturen entre los periodos de llenado. Cuando permanece algo de N2L en el fondo del tanque significa que ya está lleno (esto no se aplica al Dryshipper 3.0 de uso único).
• Pesar el tanque antes y después de llenarlo para verificar que contiene la cantidad apropiada de N2L. Los tanques secos más comúnmente usados absorben de 1 a 4 kilogramos de N2L, pesan entre 9 y 15 kg cuando están completamente llenos y dentro de su caja protectora externa, y tienen un tiempo de retención de 7 a 21 días. Consulte siempre la información del fabricante. El Dryshipper 3.0 de uso único epesa nada más 4.5 a 5 kg vuando esta lleno y tiene un tiempo de retencion de 4 días.
• Llenar el tanque y dejarlo lleno por 24 h durante la noche y comprobar nuevamente el peso antes del envío. Si es necesario debe ser agregarse un poco más de N2L antes del envío.
• Al recibir un tanque, también es una buena rutina el determinar su peso a la llegada en caso de que algo haya fallado en el envío.

Los envases de nitrógeno líquido ordinarios son costosos y generalmente el lugar de procesamiento del semen los renta. Estos deben devolverse en cuanto antes. Para evitar problemas para devolver el tanque en las oficinas de aduana, deben acompañarlo en el viaje de regreso las instrucciones para su devolución, un documento para pasar aduana y un certificado. Por ejemplo, puede ser anexada una declaración tal como la siguiente:

"El tanque de N2L y el contenedor de envío son ambos propiedad de.......... y en préstamo para.......... y será devuelto a.......... como mercancía retornable libre de franquicia."

Resultados utilizando semen canino congelado-descongelado

Se ha informado de tasas de parición del 84% a partir de 327 IA con semen congelado-descongelado [8] y 71% a partir de 312 IA con semen congelado-descongelado [8] cuando el semen se depositó en el útero usando el catéter escandinavo [4]. En un estudio a nivel de campo durante veinte años que incluyó 889 IA con semen congelado-descongelado de calidad variable procesado por gran número de centros en todo el mundo, y con IA realizadas en hembras de fertilidad variable por 114 veterinarios diferentes, la tasa de parición por IA vaginal fue de 30.1% en comparación con 49.5% por IA intrauterina (Linde Forsberg y Andersson, en preparación). Las tasas de parición por IA intrauterina en la hembra son significativamente mejores que las obtenidas por IA vaginal, no solo con semen congelado-descongelado (+51%), sino también con semen refrigerado (+44%) y con semen fresco (+30%). El tamaño de la camada usando IA intra-uterina con semen congelado-descongelado también es significativamente más grande que usando IA vaginal (Linde Forsberg y Andersson, en preparación). El tamaño de la camada ha sido estimada en un 25-30% menor en las hembras que recibieron semen congelado comparado con semen fresco y refrigerado [6-7].

8. Cuánto semen se debe enviar?

La cantidad de semen que debe enviarse depende principalmente de lo que se haya acordado. En europa, generalmente se recomienda utilizar por lo menos 150 - 200 millones de espermatozoides móviles con morfología normal por inseminación, e inseminar a la hembra dos veces. En EUA, 100 millones de espermatozoides normales y una sola inseminación son considerados adecuados.

Si el eyaculado contiene espermatozoides anormales ó con baja motilidad luego de la descongelación, el número total de espermatozoides por unidad de inseminación debe aumentarse en forma proporcional para intentar compensar por la baja calidad seminal. Sin embargo, cuando el semen no es de calidad satisfactoria no debe ser enviado, a menos que se informe de la situación, y el propietario de la perra ó el importador del semen den su consentimiento.

Si la IA es realizada mediante cirugía, que es todavía rutinaria en muchos países, se pueden requerir menos espermatozoides por IA y generalmente se hace una sola IA. Algunos colegas combinan TCI e inseminación quirúrgica para poder realizar 2 IA en una hembra. El uso de IA vaginal puede requerir hasta 10 veces más espermatozoides para obtener los mismos resultados que por IA intrauterina, tanto con semen fresco y congelado-descongelado [8,16]. El semen enfriado se puede almacenar hasta 1 - 2 semanas, si originalmente es de buena calidad y es mantenido en condiciones de frío ininterrumpido. Por lo tanto, se puede enviar suficiente semen para IA repetidas en un solo envío. En vista de los altos costos involucrados en el envío de semen congelado, puede ser una buena idea enviar bastante semen para una repetición en el estro siguiente en caso de que la hembra no quede preñada en el primer intento. Si el importador ha pagado la congelación, puede ser también razonable enviar todas las dosis de semen resultantes, a menos que se hayan hecho otros acuerdos.

9. Quién debe organizar el envío?

La mayoría de los bancos de semen canino cooperan con una empresa de transporte de mercancías. Puede demandar bastante tiempo para organizar los envíos, ya que a menudo implican derechos aduanales y otros procedimientos relacionados, tales como la necesidad de una factura pro forma y una decisión sobre el valor del envío para los impuestos/IVA y/o el seguro. Por estas razones otros lugares de procesamiento eligen dejar al propietario del perro ó de la perra para que ordene los envíos. En el caso de paises con requerimientos de exportacion mas complejos, serán necesarios conocimientos expertos. Para las "declaraciones de envíos" se necesita saber que el código para el nitrógeno líquido es UN1977, y para los tanques secos que la nota de instrucción 202 del embalaje de IATA aclara que esta clase de tanque se puede enviar como mercancía no peligrosa. También: No restringido, aprobado por IATA Especial A152 Provisión.

En la Reglamentación I.A.T.A. sobre Mercancías Peligrosas también hay disposiciones sobre mercancías peligrosas transportadas por los pasajeros o la tripulación (Subsección 2.3; Tabla 2.3.A). Dice lo siguiente: "Embalajes con aislamiento que contengan nitrógeno líquido refrigerado (embarcadores secos), totalmente absorbido en un material poroso y destinados para el transporte, a baja temperatura, de productos no peligrosos no están sujetos a este Reglamento siempre que el diseño del embalaje aislado no lo haría permitir la acumulación de presión dentro del contenedor y no permitiría la liberación de cualquier nitrógeno líquido refrigerado independientemente de la orientación del envase aislado".

También debe haber una declaración de acompañamiento para la aduana que indique que el tanque está en préstamo y será devuelto como paquete vacío, para evitar impuestos ó cuotas aduanales.

10. Quién puede realizar la IA?

La legislación nacional y las Asociaciones de Criadores pueden tener regulaciones con respecto al derecho de realizar la IA en perros, y sobre donde puede ser almacenado el semen. En varios países esto es una cuestión exclusivamente veterinaria, y en algunos países se espera que los veterinarios tomen y aprueben un curso especial para IA en perros. En otros países, los mismos criadores pueden inseminar a sus propias perras. Sin embargo, cuando se trata de semen congelado, es poco probable que esto suceda, debido a los conocimientos especiales que se necesitan para el descongelado del semen y que en general, los resultados obtenidos con la IA vaginal son pobres.

11. Cooperación entre los lugares que procesan semen y los veterinarios inseminadores

Los lugares ó agencias procesadores de semen deben proveer a los veterinarios con la información adecuada sobre la calidad del semen que envían y, en caso de semen congelado, la información sobre cómo debe ser descongelado, debido a que el método de descongelación es dependiente del de congelación, y los métodos varían entre los lugares donde se congela.

Por otra parte, la responsabilidad de elegir el momento adecuado del ciclo estral de la perra para realizar la IA, recae en el veterinario inseminador. Es muy recomendable determinar el nivel de progesterona plasmática periférica cuando se use semen fresco, semen enfriado ó semen congelado-descongelado. Se considera que el momento óptimo para la IA es 4 a 7 días después del pico de LH, es decir 2 - 5 días después del momento estimado de la ovulación. El nivel de progesterona en ese momento generalmente está entre 10 y 20 ng/ml (30 y 60 nmol/L). Sin embargo, los valores de progesterona deben interpretarse teniendo en cuenta que los niveles plasmáticos de progesterona fluctúan durante el día hasta en un 30-40%, de una manera no diurna [9]. Se recomienda tomar una citología vaginal en el momento de la prueba de la progesterona, ya que esto le ayudará a determinar si la perra se encuentra todavía en proestro, estro adecuado, o ya está en metaestro/diestro. Especialmente la transición de estro a metaestro no puede hacerse solamente basandose en el nivel de progesterona.

También es extremadamente importante la técnica de IA para obtener buenas tasas de preñez al usar el semen canino. Se obtienen resultados significativamente mejores con el depósito intrauterino comparado con el vaginal, tanto con semen canino fresco, diluido enfriado ó congelado-descongelado [3, Linde Forsberg y Andersson, en preparación]. La IA intrauterina en el perro puede hacerse con el catéter Escandinavo [4] ó con la ayuda de un endoscopio rígido y de un catéter urinario para perro [17]. También se utilizan la IA quirúrgica y la IA por laparoscopía. Existe cierto debate sobre si estos métodos son éticamente aceptables. En varios países de Europa IA quirúrgica es ilegal o está muy restringida.

Una parte importante de la cooperación entre los laboratorios que procesan el semen y los veterinarios, y que raramente es satisfactoria, es el envío de los resultados obtenidos. Aunque lleva tiempo, este seguimiento obviamente es de gran valor para ambas partes, y es crítico para cualquier evaluación objetiva del sistema de procesamiento del semen, del laboratorio de inseminación, ó de un procedimiento específico ó de cualquier modificación.

Apéndices

Apéndice 1 - Guía de las Regulaciones para el Envío Internacional de Semen Enfriado y Congelado - Descargar PDF
Apéndice 2 - Certificado Médico Veterinario para la Exportación de Semen Canino - Descargar PDF
Apéndice 3 - Certificado de Recolección de Semen Canino - Descargar PDF
Apéndice 4 - Diluyente de Yema de Huevo-Tris para Semen Canino Enfriado - Descargar PDF
Apéndice 5 - Diluyentes de Uppsala para Congelar Semen Canino - Descargar PDF
Apéndice 6 - Procedimiento de Congelación de Uppsala - Descargar PDF

Apéndice 1 - Descargar PDF

Guía rápida de las regulaciones para el envío internacional de semen canino enfriado y congelado

En paralelo con el creciente interés en el envío internacional de semen canino hay una demanda de una fuente de referencia rápida de las normas y la reglamentación que para la importación de semen de perro que se aplican en los distintos países. La presente guía fue publicada por primera vez en 2001. Al actualizarla me di cuenta de que estamos viviendo hoy en un mundo totalmente diferente, y que la mayoría de la información se pueden encontrar fácilmente en Internet. En lugar de enumerar las direcciones postales, números de teléfono y de fax que, se proporcionan a las direcciones web de los Ministerios de Agricultura y de las Asociaciones de Criadores en varios países. Como será evidente, esta lista está lejos de ser completa, y a pesar de mis esfuerzos, podría en parte, también ser incorrecta, sin embargo espero que pueda ser de alguna utilidad. Hay que recordar que las normas y reglamentos pueden ser modificados en cualquier momento. Por lo tanto, siempre buscar las últimas versiones oficiales.

La autora agradecería mucho las aportaciones de los lectores de todo el mundo con las actualizaciones y correcciones a esta lista, y con información de los países todavía no incluidos en la lista (Contacte a la Dra. Linde Forsberg).

Algunas direcciones útiles
La información sobre casi 90 Asociaciones de Criadores de todo el mundo se puede encontrar en la página web de la Federación Cinológica Internacional (FCI): http://www.fci.be/membres.aspx. Otros pueden ser encontrados buscando su nombre en internet.
Lista de la Unión Europea de los Ministerios de Agricultura de los países miembros: http://ec.europa.eu/agriculture/links-to-ministries.

UE: Para la importación de semen de perro de otros países dentro de la UE, por lo general sólo se requiere un certificado médico veterinario emitido en el momento de la recolección de semen, indicando también el número de microchip o tatuaje de identificación, las marcas del perro, y que el perro tiene un estado testicular normal.

Alemania

Ministerio Alemán de Agricultura (Bundesministerium für Verbraucherschutz, Ernährung und Landwirtschaft), email: [email protected]
Asociación Cinofílica Alemán (Verband für das Deutsche Hundewesen, VDH), http://www.vdh.de

Australia

Servicio de Inspección y Cuarentena Australiana (AQIS/DAFF)
http://www.daff.gov.au/biosecurity/import/live-animals, http://apps.daff.gov.au/icon32
Consejo Canino Nacional Australiano (ANKC) P.O. Box 1005, St. Marys, New South Wales 2760, Australia.
Teléfono: +61-2 98 34 40 40; Fax: +61-2 98 34 60 38; email:[email protected];
http://www.ankc.org.au/Contact-Us.aspxm.

Austria

Ministerio Federal de Salud (Bundesministerium für Gesundheit), Veterinärvervaltung, www.bmg.gv.at
Asociación Cinofílica Austríaco (Österreichischer Kynologenverband, ÖKV), email: [email protected];
http://www.oekv.at

Bélgica

Ministerio de Agricultura Belga (Ministère de l´agriculture), Service de l´Inspection Vétérinaire. Véase arriba bajo UE.
Asociación Cinofílica Belga (Union Royale Cynologique Saint Hubert), http://www.srsh.be, email: [email protected]

Canadá

Agencia Canadiense de Inspección de Alimentos (CFIA), http://www.inspection.gc.ca/eng/
Asociación Cinofílica Canadiense (CKC), http://www.ckc.ca

Dinamarca

Administración Danesa de Alimentos y Veterinaria, (Ministeriet for Fodevarer, Landbrug og Fiskeri), http://www.fvm.dk, email:[email protected]
Asociación Cinofílica Danés (Dansk Kennel Klub), http://www.dansk_kennel_klub.dk

España

Ministerio Español de Agricultura, http://www.mapya.es/indices/pags/info/index.htm
Asociación Cinofílica Español (Real Sociedad Central de Fomento de Razas Caninas en España), email: [email protected], http://www.rsce.es

Estados Unidos de América

Administración de Drogas de Estados Unidos (USDA), http://www.usda.gov
Asociación Cinofílica Americana (AKC), http://www.akc.org

Finlandia

Ministerio Finlandés de Agricultura y Silvicultura (Jord- och skogsbruksministeriet), http://www.mmm.fi
Asociación Cinofílica Finlandés (Suomen Kennelliitto-Finska Kennelklubben r.y.), http://www.kennelliitto.fi

Francia

Ministerio Francés de Agricultura, http://www.agriculture.gouv.fr
Asociación Cinofílica Francés (Société Centrale Canine de France), http://www.scc.asso.fr.

Hungría

Junta Húngara de Agricultura (Földmûvelésügyi és Vidékfejlesztési Minisztérium), email: [email protected]; for website see under EU above.
Asociación Cinofílica Húngara (Magyar Ebtenyésztok Országos Egyesülete, MEOE), http://www.kennelclub.hu

Irlanda

Departamento de Agricultura y Alimentación, http://www.agriculture.gov.ie, email: [email protected]
Asociación Cinofílica Irlandesa, http://www.ikc.ie/index.php, email: [email protected]

Italia

Ministerio Italiano de Agricultura, email:[email protected]; http://www.politicheagricole.it
Asociación Cinofílica Italiana (Ente Nazionale della Cinofilia Italiana, ENCI), email:[email protected]; http://www.enci.it

Japón

Ministerio de Agricultura del Japón, http://www.maff.go.jp/e/
Asociación Cinofílica Japonesa, http://www.jkc.or.jp

Noruega

Ministerio Noruego de Salud Animal (Statens Dyrehelsetilsyn), email: [email protected], http://www.mattilsynet.no
Asociación Cinofílica Noruega (Norsk Kennel Klub, NKK), email: [email protected], http://www.nkk.no

Nueva Zelanda

Ministerio de Agricultura y Silvicultura, P.O. Box 2526, Wellington, New Zealand. http://www.biosecurity.govt.nz/imports/animals/standards/general-info-germplasm.htm
Asociación Cinofílica de Nueva Zelanda, email:[email protected], http://www.nzk.org.nz

Países Bajos

Ministerio Holandés de Agricultura, Manejo de la naturaleza e Industrias Pesqueras, http://www.minlnv.nl
Asociación Cinofílica Holandés (Rad van Beheer op Kynologish Gebied in Nederland), http://www.raadvanbeheer.nl/

Reino Unido/Gran Bretaña

Departamento de Medio Ambiente, Alimentación y Asuntos Rurales (DEFRA), 1A Page Street, London, SW1P 4PQ, United Kingdom, http://www.defra.gov.uk, email:[email protected],
Asociación Cinofílica, Clarges Street, London, http://www.the-kennel-club.org.uk

República de África del Sur

Departamento Nacional de Agricultura, Silvicultura e Industrias Pesqueras, email: [email protected], http://www.daff.gov.za
Asociación Cinofílica de África Meridional, email: [email protected], http://www.kusa.co.za

República Checa

Veterinario de Estado de la República Checa (Státni Veterinární Správa Ceské Republiky), http://eagri.cz/public/web/mze
Asociación Cinofílica Checa (Ceskomoravská Myslivecká Unie), email:[email protected]; http://www.cmku.cz

Singapur

Autoridad de Singapur Agroalimentaria y Veterinaria, Teléfono: +65-6227 0670, Fax: +65 6227 6305
Asociación Cinofílica de Singapur, http://www.skc.org.sg

Suecia

Junta Sueca de Agricultura, http://www.sjv.se
Asociación Cinofílica Sueca, http://www.skk.se

Suiza

Oficina Veterinaria Federal (Bundesamt für Veterinärwesen), http://www.bvet.admin.ch
Asociación Cinofílica Suiza (Schweizerischen Kynologischen Gesellschaft), http://www.skg.ch

Apéndice 2 - Descargar PDF

Clique aquí para cargar e imprimir el certificado veterinario de salud para exportación de semen de perro.

Apéndice 3 - Descargar PDF

Clique aquí para cargar e imprimir el certificado de recolección de semen canino.

Apéndice 4 - Descargar PDF

Apéndice 5 - Descargar PDF

CANIREP UPPSALA EQUEX II

Apéndice 6 - Descargar PDF

El procedimiento de congelado de semen de CANIREP UPPSALA

Se recolecta la segunda fracción ó fracción rica en esperma. Después de evaluar la morfología y la motilidad y contar el número total espermatozoides, el eyaculado se centrifuga a 700 G por 6 min. El sobrenadante se remueve (y si todavía contiene espermatozoides puede centrifugarse otra vez) y el pellet se diluye a temperatura ambiente con el Sistema del Diluyente CaniRep Uppsala Equex 2 a una concentración de 400 x 106 espermatozoides/ml y se le permite equilibrar por 60 - 75 min a +4°C. Un volumen igual del Sistema del Diluyente CaniRep Uppsala Equex 2 también se enfría a +4°C y se agrega después del período de equilibrio, inmediatemente antes de llenar las pajillas de 0.5 ml, resultando en una concentración final de 200 x 106 espermatozoides/ml. Las pajillas se congelan sobre vapores de N2L en tanques térmicos Apollo SX-18 ó TW-10 XT ó tanques similares para N2L (Minnesota Valley Engineering, Inc., New Prague, MN, ó Taylor-Wharton, Theodore, AL, USA) conteniendo 15 - 18 ml de N2L. El congelado se realiza en tres pasos, con los cartuchos en la parte de arriba de los bastones y con la parte superior de estos a 7, 13 y 20 cm (por 2, 2 y 1 min) por debajo de la abertura del tanque, respectivamente; entonces la canastilla se sumerge en el N2L. No deben ponerse más de 4 pajillas por cada cartucho, y no deben congelarse más de 4 cartuchos (es decir un total de 16 pajillas) a la vez.

Las pajillas también pueden ser congeladas usando una caja de poliestireno ó unicel que contenga N2L con las pajillas colocadas horizontalmente en un bastidor ubicado 4 cm sobre la superficie del N2L por 10 min después de lo cual las pajillas se sumergen en el N2L, o se congelan en una máquina de congelación de acuerdo con las instrucciones del fabricante.

Usualmente el semen se congelada de manera tal que el número final de espermatozoides por pajilla esté sea de 100 x 106. Dependiendo de la calidad del semen generalmente se usan 2 - 3 pajillas por cada IA. En las razas chicas que producen menor cantidad de espermatozoides por eyaculado puede ser deseable congelar semen menos concentrado para obtener más pajillas.

Descongelado de las Pajillas

Las pajillas se descongelan mejor a baño María a +70°C por 8 segundos. Si esto no es práctico pueden ser también descongeladas a +37°C por 30 - 60 segundos. La pajilla se seca cuidadosamente antes de abrirse. Cada pajilla se vacía en 0.5 - 1 ml del medio de descongelado de CaniRep Uppsala Equex 2 a +37°C y se deja a esta temperatura por aproximadamente 5 minutos antes de evaluar la calidad seminal y realizar la IA.